黑水虻幼蟲(chóng)粉(BSFLM)被證明是一種有前途的魚(yú)粉 (FM) 替代品，用于包括歐洲鱸魚(yú)在內(nèi)的幾種魚(yú)類(lèi)的日糧。然而，它對(duì)抗氧化能力的影響以及經(jīng)過(guò)處理的魚(yú)的免疫反應(yīng)仍然知之甚少。

本次試驗(yàn)用不同水平的黑水虻幼蟲(chóng)粉部分替代魚(yú)粉對(duì)歐洲鱸魚(yú)的抗氧化狀態(tài)、非特異性免疫、轉(zhuǎn)錄組反應(yīng)和對(duì)溶藻弧菌攻擊的抵抗力的影響。

通過(guò)替換日糧中0%、25%、35% 和 50%的魚(yú)粉來(lái)配制日糧。每種日糧被隨機(jī)分配到四個(gè)魚(yú)組（每組3個(gè)平行）（初始平均體重，12.1 ± 0.21 g）（每個(gè)水族箱20 條魚(yú)）。每天喂魚(yú)3次至明顯飽食，試驗(yàn)為60天。

結(jié)果表明黑水虻幼蟲(chóng)粉50%替代日糧中魚(yú)粉不會(huì)對(duì)魚(yú)類(lèi)健康產(chǎn)生負(fù)面影響，可能會(huì)增強(qiáng)抗氧化狀態(tài)和歐洲鱸魚(yú)的免疫反應(yīng)。

本研究中使用的黑水虻幼蟲(chóng)粉來(lái)自埃及 Kafr El Sheikh 的 Kafr El Sheikh 大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖和漁業(yè)學(xué)院。 

黑水虻幼蟲(chóng)粉蛋白替代日糧中0%、25%、35%和50%的魚(yú)粉（標(biāo)記為BSFLM0、BSFLM25、BSFLM35 和 BSFLM50）。這些日糧的成分被徹底粉碎、適當(dāng)混合并制成顆粒。

240條歐洲鱸魚(yú)（平均初始體重12.10±0.21g）來(lái)自埃及亞歷山大省Wadi Mariout 的一個(gè)私人養(yǎng)魚(yú)場(chǎng)。

魚(yú)運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室并放置 14 天以適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。在馴化期間，以基礎(chǔ)對(duì)照日糧喂養(yǎng)魚(yú)。然后將魚(yú)隨機(jī)分配到12個(gè)150升水族箱（n = 3）（每個(gè)水族箱 20 條魚(yú)），每3個(gè)水族箱為一個(gè)實(shí)驗(yàn)組。用手喂魚(yú)，直到視覺(jué)飽食（每天三次），持續(xù) 60 天。

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)進(jìn)行血液和組織取樣，測(cè)試非特異性免疫反應(yīng)，提取氧化應(yīng)激生物標(biāo)志物和RNA提取、cDNA合成和qRT-PCR，并進(jìn)行定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和攻毒試驗(yàn)。

3.1. 免疫反應(yīng)

表3說(shuō)明了實(shí)驗(yàn)組之間免疫參數(shù)的差異。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組之間的吞噬活性（PA）和吞噬細(xì)胞指數(shù)(PI)有顯著差異，所有黑水虻幼蟲(chóng)粉組都提高了處理魚(yú)的吞噬細(xì)胞能力，它們之間沒(méi)有顯著差異。同樣，與對(duì)照組相比，黑水虻幼蟲(chóng)粉組的血清中性粒細(xì)胞耗氧量和溶菌酶（LYZ） 活性顯著增加。BSFLM35和BSFLM50 組之間沒(méi)有顯著差異。

3.2. 氧化應(yīng)激參數(shù)

表4顯示了飼養(yǎng)不同黑水虻幼蟲(chóng)粉水平的歐洲鱸魚(yú)飼喂60天后的抗氧化參數(shù)的顯著差異。與BSFLM25組和對(duì)照組相比，BSFLM35和BSFLM50組血清丙二醛（MDA）水平顯著升高。此外，與對(duì)照組相比，所有黑水虻幼蟲(chóng)粉組血清的過(guò)氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性均顯著升高。

3.3. 基因轉(zhuǎn)錄

在本研究中，與對(duì)照組相比，黑水虻幼蟲(chóng)粉組的肝臟 IL-10（圖 1A）、IL-1β（圖 1B）和HSP70（圖1C）基因的 mRNA 表達(dá)水平顯著增加。BSFLM50組在所有其他組中表現(xiàn)出最高的表達(dá)值。

3.4. 攻毒試驗(yàn)和抗病性

圖2顯示，當(dāng)用溶藻弧菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)攻擊時(shí)，黑水虻幼蟲(chóng)粉組的相對(duì)存活率（RPS）與對(duì)照組相比顯著增加。BSFLM0組的魚(yú)表現(xiàn)出最高的死亡率（75%），其次是BSFLM25、BSFLM35和BSFLM50，分別為55%、40%和35%。BSFLM50組在所有實(shí)驗(yàn)組中的死亡率百分比最低。

研究的結(jié)果表明，用不同水平的黑水虻幼蟲(chóng)粉部分替代日糧中的魚(yú)粉不會(huì)對(duì)歐洲鱸魚(yú)的健康狀況產(chǎn)生有害影響。

黑水虻幼蟲(chóng)粉可以增強(qiáng)非特異性免疫反應(yīng)，如吞噬活性、吞噬細(xì)胞指數(shù)、血清溶菌酶和中性粒細(xì)胞耗氧量，增強(qiáng)抗氧化能力，增加HSP70、IL-10和IL-1β基因，并提高了歐洲鱸魚(yú)對(duì)溶藻弧菌攻擊的抵抗力。然而，應(yīng)考慮進(jìn)一步詳細(xì)的研究，特別是對(duì)魚(yú)類(lèi)先天免疫、幾種免疫和抗氧化基因的轉(zhuǎn)錄、抗氧化機(jī)制和黑水虻幼蟲(chóng)粉的抗菌效率。